●プライマー配列（5’→3’）/アンプリコンシーケンス解析（illumina MiSeq）用
1st-cMiFish F：
①ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-NNNNNN–RGTTGGTAAATCTCGTGCCAGC
②ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-NNNNNN–GTCGGTAAAACTCGTGCCAGC
③ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-NNNNNN–GCCGGTAAAACTCGTGCCAGC
④ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-GCCGGTTAATCTCGTGCCAGC
1st-cMiFish R：
①GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT-NNNNNN–GCATAGTGGGGTATCTAATCCTAGTTTG
②GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT-NNNNNN–CATAGTGGGGTATCTAATCCCAGTTTG
③GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT-NNNNNN–CATAGGAGGGTGTCTAATCCCCGTTTG
④GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT-CATAGTGGGGTATCTAATCCCAGTTTG
※それぞれ①：②：③：④=2：4：2：1で混合したプライマーです。

細字：アダプター配列（2nd PCR用のプライマーとの相同部分）
赤字 N：シーケンス解析時における品質向上を目的として、1-6塩基の異なる長さのランダム配列が挿入された混合プライマーです
太字：12S rRNA との相同配列

●参考文献
Miya M et al. R. Soc. open sci. (2015) 2:150088

●1stPCR後の増幅長
約290 bp

1stPCRの反応組成と反応条件例

以下は、 PCR 酵素に ExTaq HS [TaKaRa]を使用した例です。
他の PCR 酵素を使用する場合は、そのPCR酵素推奨の反応組成・反応条件で調製してください。