●プライマー配列（5’→3’）/アンプリコンシーケンス解析（illumina MiSeq）用
1st_PCR_V3V4f_MIX（341f)：
ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-NNNNN–CCTACGGGNGGCWGCAG
1st_PCR_V3V4r_MIX（805r)：
GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT-NNNNN–GACTACHVGGGTATCTAATCC

細字：アダプター配列（2nd PCR用のプライマーとの相同部分）
赤字 N：シーケンス解析時における品質向上を目的として、0-5塩基の異なる長さのランダム配列が挿入された混合プライマーです
太字：16S rRNA との相同配列

●参考文献
Illumina Inc. Part #15044223 Rev.B

●1stPCR後の増幅長
約530 bp

1stPCRの反応組成と反応条件例

以下は、 PCR 酵素に KOD FX Neo [TOYOBO]を使用した例です。
他の PCR 酵素を使用する場合は、そのPCR酵素推奨の反応組成・反応条件で調製してください。