●プライマー配列（5’→3’）/アンプリコンシーケンス解析（illumina MiSeq）用
1st-fITS7：
ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-GTGARTCATCGAATCTTTG
1st-ITS4：
GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT-TCCTCCGCTTATTGATATGC

細字：アダプター配列（2nd PCR用のプライマーとの相同部分）
太字：ITS との相同配列

※2023.12.19　Forwardの配列に誤りがあったため、修正いたしました。
誤）ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-GAACACAGCGAAATGTGA
正）ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-GTGARTCATCGAATCTTTG

●参考文献
Ihrmark K et al. FEMS Microbiol Ecol (2012) 82(3):666-677

●1stPCR後の増幅長
ITS領域は生物種により長さが異なるため、複数の長さの増幅産物が得られる可能性があります。

1stPCRの反応組成と反応条件例

以下は、 PCR 酵素に KOD FX Neo [TOYOBO]を使用した例です。
他の PCR 酵素を使用する場合は、そのPCR酵素推奨の反応組成・反応条件で調製してください。